Пълна кръвна картина
Кръвният тест включва дефиницията на:
- брой левкоцити
- определяне на скоростта на утаяване на еритроцитите
Лабораторни кръвни тестове
Осигуряването на висококачествени хематологични изследвания е възможно със стандартизация на преданалитичните и аналитични етапи на работа.
Преаналитични грешки 68,2%
Аналитични грешки 13.3%
Постаналитични грешки от 18.5%
Фактори, влияещи върху броя на кръвните клетки
- физически и емоционален стрес
- сезонни, климатични, метеорологични условия
- активността на пациента и положението на тялото му в момента на вземане на кръв.
Хемоглобинът и хематокритът при пациенти в податливи позиции са намалени с около 6%. Тежка диария и повръщане могат да доведат до значителна дехидратация и хемоконцентрация.
Ефектът на дневните биоритми върху кръвната картина
- костният мозък е най-активен сутрин
- далак и лимфни възли около 17 - 20 часа
- максималният хемоглобин в кръвта се наблюдава от 11 до 13 часа и най-малко от 16 до 18 часа;
- еозинофилите са най-ниски сутрин между 9 и 11 часа, пикът на еозинофилите се появява до 3 часа сутринта.
Трябва да се извършат кръвни изследвания (с изключение на спешни случаи), за да се получат съпоставими резултати.
Вземане и подготовка на материали за научни изследвания:
Взимате кръв
- Точността и точността на резултатите се влияят от техниката за вземане на кръвни проби, използваните инструменти (игли, скарификатори и др.), Епруветките, в които се извършва вземането на проби, и впоследствие се съхраняват и транспортират.
- Стандартизирането на предварителния етап чрез използването на стандартизирани търговски консумативи за улавяне, съхранение и транспортиране на биологични проби, стандартни реагенти и диагностични системи може значително да подобри точността и точността на изследването.
Взема се кръв за общ клиничен анализ:
- при новородени - от петата
Кръвни тестове се препоръчват сутрин на празен стомах, преди тренировка и различни диагностични процедури, медикаменти, особено когато се прилагат парентерално.
- Най-добрият начин да се аспирира кръвта са вакутайнери (вакуумни системи за събиране на кръв - Terumo, BD):
- съдържат определено строго дозирано количество антикоагулант и осигуряват стандартни условия за аспирация на целия кръвен обем
- бързо и висококачествено събиране на кръв на пациента
- намаляване на времето за събиране на кръв с 30–50%
- кръвта in vitro не се подлага на хемолиза
- една венепункция е достатъчна, за да вземе кръв в няколко тръбички
- няма пряк контакт на медицинска сестра или лаборант с кръвта на пациента, което осигурява превенция на вирусни инфекции, предавани по парентерален път.
- Вземането на кръв с помощта на спринцовка без антикоагулант, последвано от преливане в епруветката е неприемливо:
- контактът на кръвта със стените на спринцовката води до образуване на тромбоцитни агрегати
- трудно да се поддържа точна съотношение кръв / антикоагулант
- налягането в иглата увеличава вероятността от хемолиза и пръски от кръв
- нарушение на целостта и стерилността на пробата
- - вероятност от инфекция на персонала
За хематологични проучвания се препоръчва капилярна кръв в следните случаи:
- малки или труднодостъпни вени
- склонност към венозна тромбоза
- След пробиване на пръста, няколко капки кръв (най-малко 3-4) се спускат върху отделно стъкло или гнездо на пластмасова таблетка, смесват се и се използват за работа.
- Кръвта се събира от индивидуална, стерилна капилярка Панченко, предварително овлажнена с натриев цитрат.
- След пробиване на кожата на пръста, 6-8 капки кръв се оттичат в пластмасова тръба с антикоагулант K2EDTA или K3EDTA (Trilon B) в размер на 1,5-2,2 mg на 1 ml кръв, или
специални пластмасови епруветки за еднократна употреба, обработени K2EDTA (фирма "De-ta-ab", "Sarstedt", "Becton Dickinson" и др.). Веднага след вземането на проби е необходимо да се разбърка добре, като тръбата се завърта с капачката поне 10 пъти.
антикоагулант:
- K2EDTA или K3EDTA (дву- или трикалиев етилендиаминтетраацетат или трилон Б)
- EDTA е предпочитаният антикоагулант при изчисляване на кръвни телца с помощта на автоматични хематологични анализатори. Концентрацията на EDTA в взетата кръв трябва да бъде постоянна и да бъде 1,5 - 2,2 mg / ml кръв (например, за да се получи съотношение 1,5 mg / ml в епруветка, предназначена за 2 ml кръв, да се излее 0,04 ml 7,5 % разтвор на K2EDTA или K3EDTA). Липсата на антикоагулант води до микрокоагулация на кръвта и образуването на съсирек, излишък - е причината за повишаване на осмотичното налягане на кръвта и свиването на клетките. При някои пациенти може да се наблюдава лека спонтанна тромбоцитна агрегация или, по-рядко, т.нар. EDTA-зависима псевдотромбоцитопения (с имунна природа). Употребата на Na2EDTA не се препоръчва поради лошата му разтворимост в кръвта.
- Хепаринът е най-добрият антикоагулант за определяне на осмотичната резистентност на червените кръвни клетки и функционалните изследвания на белите кръвни клетки, включително редица тестове с имунологични маркери. Характерно за действието на този антикоагулант е способността за предотвратяване на хемолизата колкото е възможно повече. Мазите, приготвени от хепаринизирана кръв и рисувани според Романовски, имат синкав фон.
- Натриевият цитрат е антикоагулант по избор при проучвания на кръвосъсирването и функцията на тромбоцитите.
Използването на хепарин или натриев цитрат като антикоагуланти е придружено от промени в клетъчната структура и следователно не се препоръчва за изследване на морфологията на кръвните клетки, освен това, хепарин не предотвратява агрегацията на клетките, поради което не е препоръчително да се използва при преброяване на левкоцити и тромбоцити.
Доставка, съхранение и подготовка на пробата за изследването:
- Кръвните изследвания трябва да се извършват или непосредствено след приемане (възможността за спонтанна агрегация на тромбоцитите се изключва), или 25 минути по-късно (времето, необходимо за адаптиране на тромбоцитите към антикоагуланта) и не по-късно от 6 часа след вземане на кръв.
- Ако е необходимо да се извърши забавен анализ (транспортиране на дълги разстояния, техническа неизправност на устройството и др.), Кръвните проби се съхраняват в хладилник (4 ° - 8 ° С) и се изследват в рамките на 24 часа. Кръвта не може да бъде замразена.
- Кръвният тест на устройството се провежда при стайна температура. Кръвта, съхранявана в хладилника, трябва да се затопли до стайна температура, тъй като вискозитетът на кръвта се повишава при ниски температури и образуваните елементи са склонни да се слепват, което от своя страна води до нарушено смесване и непълна лизис. Изследването на студената кръв може да предизвика появата на тричленна левкоцитна диференциация поради свиване на хистограмата на левкоцитите.
- При извършване на хематологични изследвания на значително разстояние от мястото на събиране на кръвта, проблемите неизбежно възникват поради неблагоприятни условия на транспортиране. Излагането на механични фактори (разклащане, вибрации, смесване и др.), Температурни смущения, вероятност от разливане и замърсяване на пробите могат да повлияят на качеството на анализите.
- За да се премахнат тези причини, се препоръчва да се използват херметично затворени пластмасови епруветки, специални транспортни изолирани контейнери, когато се транспортират тръби с кръв.
Анализ на LE клетки (кръв с EDTA)
LE клетки (кръв с EDTA)
Какво представляват LE клетките?
LE клетките са дефектни неутрофили с ядрени включвания на левкоцити, лизирани от тях. Името на тези клетки се дава след първите букви на латинското наименование за системен лупус еритематозус (Lupus erythematosus), тъй като те са били идентифицирани за първи път при пациенти с това заболяване. Най-високата степен на откриване на LE клетки в SLE, но те се появяват и при пациенти с други системни заболявания:
- ревматоиден артрит,
- дерматомиозит,
- системна склеродермия.
LE-фактор - комплекс от специфични циркулиращи имунни комплекси (CIC) с антинуклеарна активност, които разрушават не само ядрения материал на отбранителните клетки, но също така се установяват върху ставните повърхности, стените на съдовете, задържат се в бъбреците (лупус нефрит) и имат увреждащ ефект върху тези тъкани,
Метод на анализ
Кръв за анализ на LE клетки, взети от вената на празен стомах в обем от 10 ml. За да се предотврати коагулирането на кръвта по-дълго и да не се променят нейните свойства, се добавя антикоагулант на етилен диамин оцетна киселина (EDTA). Това ви позволява да удължите срока на годност на кръвта и да получите по-точни данни.
EDTA се добавя директно в епруветката преди вземане на проби при концентрация от 1,5 mg антикоагулант на сухо вещество на 1 ml кръв. Има специални фабрично изработени епруветки, стените на които вече са обработени с ЕДТА в необходимото количество, което улеснява работата на лабораторните техници.
ЕДТА тръбата е наполовина пълна с кръв и люлки за равномерно разпределение на антикоагуланта, след което продължават да се пълнят до необходимия знак. Невъзможно е да се разклати тръбата, тя предизвиква образуване на пяна и уврежда клетките.
Анализът се провежда съгласно метода на Tsinkhoma-Conley, модификация в която е направен от E.N. Новоселов.
Масата от левкоцитите се освобождава от кръвта, след това получената суспензия се филтрира през най-малкото сито или се разклаща със стъклени перли. Това се прави, за да се повреди мембраната на левкоцитите. След тези манипулации, епруветката с тестовия материал се инкубира за един час при 37 ° С.
Появата на LE клетките показва наличието на антинуклеарни имунни комплекси и потвърждава автоимунния характер на заболяването.
За какво е тест за клетка LE?
Анализът на наличието на LE клетки се извършва както за диагностика, така и за наблюдение на ефективността на лечението на системен лупус еритематозус. Клетките се откриват в ранен стадий на заболяването и по време на обострянето. Те могат да бъдат открити не само в кръвта, но и в урината и в червения костен мозък. След назначаването на терапията броят на тези клетки се свежда до пълно изчезване. Анализът на LE клетките е индикатор за тежестта и активността на процеса, както и за успеха на лечението на SLE.
При други системни заболявания процентът на LE клетките е много малък, така че този анализ е от второстепенно значение.
LE клетки (кръв с EDTA)
Автоимунни антитела: LE клетки (кръв с EDTA)
Анализът, насочен към откриване в кръвта на така наречените LE-клетки или клетки на системния лупус еритематозус (СЛЕ), лупус-клетките, е един от тестовете на лабораторната диагностика на това заболяване.
LE клетки са морфологични маркери на системно автоимунно заболяване, SLE. Те представляват неврофилни левкоцити със специфична морфология, изразени в присъствието на фагоцитирани фрагменти от ядрата на клетките под формата на безструктурна хомогенна формация и ядрото на собствения неврофил, изместено към периферията и с форма на полумесец.
Образуването на такива клетъчни структури е резултат от имунологични събития, характерни за системния лупус еритематозус, които се срещат в присъствието на специална фракция имуноглобулини в кръвната плазма, LE-фактор с антиядрена активност.
Фактът на откриване на лупус клетки в кръвта показва наличието на антинуклеарни антитела в плазмата, което от своя страна е показател за автоимунната природа на заболяването.
LE клетките се откриват в 40-90% от случаите на СЛЕ и много по-рядко (не повече от 10%) при други заболявания с автоимунен характер, както в кръвта, така и в плевралната, перикардна, перитонеална ексудати, в цереброспиналната течност.
Характеризира се с появата на лупус клетки в кръвта на пациентите в ранните стадии на заболяването, както и в периода, когато е налице влошаване, техният брой зависи от тежестта на заболяването.
Приемът на лекарства може да доведе до намаляване на броя на LE клетките, открити в кръвната плазма, докато те изчезнат напълно.
Показания за анализ
Метод на анализ
Същността на анализа е да се идентифицират лупус клетки в кръвта на пациента, като се използва микроскопско изследване.
Венозна кръв, взета от пациент сутрин на празен стомах и поставена в ЕДТА тръба като антикоагулант, преди началото на курса на медикаментозна терапия, се използва като материал за изследването.
Този анализ се извършва по метода на Зинхома-Конли, модифициран от Е. Н. Новоселова. Техниката включва поставяне на прясно събраната кръв на пациента в епруветка с антикоагулант ЕДТА. В резултат на редица манипулации, включително инкубация на кръвни клетки, механично въздействие върху тях, допринасящи за образуването на LE-клетки, центрофугиране, освобождава се левкоцитна маса, от която се получават препарати. Те са обект на фиксация и оцветяване с хематологични багрила. Методът отнема доста време, има определен праг на чувствителност, специфичност, възпроизводимост.
Резултатите от изследването и тяхната интерпретация
Липсата на LE клетки в кръвните препарати е нормална.
Идентифицирането на лупус клетките показва наличието на заболявания от автоимунната природа:
- системен лупус еритематозус - от единични клетки, умерен брой, голям брой, в зависимост от степента на заболяването;
- системна склеродермия, смесени заболявания на съединителната тъкан, хроничен хепатит в активна фаза, дерматомиозит, ревматоиден артрит - в малки количества, непостоянен.
Едта какво е този анализ
Кръвни проби
Основният тип биологичен материал, който се анализира, е кръвта. Кръвта се състои от клетки (червени кръвни клетки, бели кръвни клетки и тромбоцити) и течна част, която е разтвор на много неорганични и органични вещества. Това е течността, която се анализира в повечето лабораторни тестове. Следователно първата стъпка след вземане на кръвни проби и преди изпращането им в лабораторията е да се отдели течната част от кръвта от клетките чрез центрофугиране на пробите. Течната част на кръвта, която се получава след центрофугиране, може да бъде плазма или серум.
1. Цяла кръв
Цялата кръв е проба от венозна, артериална или капилярна кръв, в която концентрацията и свойствата на клетъчните и вътреклетъчните компоненти остават относително непроменени в сравнение с състоянието in vivo. Добавянето на антикоагуланти към пробата от цялата кръв стабилизира клетъчните и вътреклетъчните компоненти за определен период от време.
Серум - неразделена извънклетъчна кръв след завършване на адекватен процес на кръвосъсирване. За отделяне на серум от кръвни клетки в кръвна проба, взета от пациент, вакуумната тръба трябва да се остави при стайна температура в продължение на най-малко 30 минути. За да се получи висококачествена проба, е важно да се издържи пълното време на съсирване на кръвта. Този период може да бъде по-кратък, ако се използва активатор на коагулацията.
Предимствата от използването на серум в сравнение с плазмата се дължат на факта, че добавянето на антикоагуланти може да предизвика интерференция с някои аналитични методи за лабораторен анализ или да промени концентрацията на определените компоненти:
смесване на катиони в антикоагуланти: Nh5 +, Li +, Na +, K +;
интерференция на аналит, причинена от свързването на метала с EDTA и цитрата (например, понижаване на активността на алкалната фосфатаза по време на свързването на цинка, намаляване на активността на металопротеиназата, инхибиране на металозависимото клетъчно активиране по време на функционални изследвания, свързване на йонизиран калций с хепарин);
интерференция на фибриноген в хетерогенни имунни изследвания;
инхибиране на метаболитни или каталитични реакции чрез хепарин (например, Taq полимераза в полимеразна верижна реакция);
интерференция на EDTA, цитрат с разпределението на йони между интра- и междуклетъчните пространства (например, Cl-, Nh5 +);
Протеиновата електрофореза трябва да се извършва само в серум.
Интерференция - интерференция на външен фактор в резултатите от анализа.
Ако към вакуумната тръба (vacutainer) с кръвна проба се добавят антикоагуланти, кръвта остава течна (не се съсирва) и течната част, получена след центрофугиране, се нарича плазма.
Предимства на използването на плазмата:
спестяване на време: кръвните проби могат да бъдат центрофугирани веднага след като бъдат получени (няма нужда да се изчаква поне 30 минути, за да се получи серум);
продукцията на плазмата от същия кръвен обем е с 15-20% повече от серума;
Превенция, причинена от коагулационна интерференция, когато се използва серум.
Поради промените, причинени от кръвосъсирването във вакуумната тръба, някои проучвания дават надеждни резултати само при използване на плазма (например, невроспецифична енолаза, серотонин, амоняк).
Антикоагулантите са добавки, които инхибират съсирването на кръвта и / или плазмата, което гарантира, че няма значителни промени в изследваните компоненти преди аналитичния процес.
Коагулацията на кръвта се предотвратява чрез свързване на калциеви йони (EDTA, натриев цитрат) или чрез инхибиране на тромбиновата активност (хепарин, хирудин). Твърди или течни антикоагуланти във вакуумни тръби трябва да се смесват с кръв веднага след вземане на кръвни проби.
EDTA е сол на етилендиаминтетраоцетна киселина. Използват се две калиеви (К2), трикалиеви (КЗ) и динатриеви (Na2) соли. Концентрации: от 1.2 до 2.0 mg / ml кръв (от 4.1 до 6.8 mmol / l кръв) при скорост на безводна EDTA. За хематологични изследвания е за предпочитане да се използват вакуумни тръби с К2 EDTA, тъй като той осигурява по-голяма стабилност на размера на кръвните клетки и не разрежда пробата.
В вакуумни тръби за изследване на хемостазната система се използва тризаменен натриев цитрат (дихидротринатриев цитрат Na3C6H5O7 * 2h3O) при концентрация от:
0.105 mol / l; 3,13% (31,3 g / 1);
0.109 mol / l; 3,20% (32,0 g / 1);
0.129 mol / l; 3.80% (38.0 g / l).
Съгласно препоръките на СЗО и Националния комитет по стандартизация в клиничната лаборатория (САЩ), за предпочитане е да се използват 0.109 mol / L (3.20%) тринатриев цитрат на лимонената киселина. За изследване на работата на хемостазната система се препоръчва смес от една част цитрат с 9 части кръв.
За определяне скоростта на утаяване на еритроцитите (ESR) се използват 0.105 mol / L (3.13%) тринатриев цитрат на лимонена киселина. При изследването на ESR се смесва една част от цитрат с 4 части кръв.
За да се осигури стабилност на кръвни проби за изследване на хемостаза във вакуумни тръби, се използват комплексни пълнители (натриев цитрат / теофилин, / аденозин / дипиридамол)., Тръби със сложен пълнител не могат да се използват за изследване на тромбоцитната агрегация. Съотношението на антикоагулант / кръв в тези епруветки е 1: 9 при концентрация на натриев цитрат 0.109 mol / L (3.20%). Вакуумни тръби със сложен пълнител се препоръчват при централизиране на хемостазната система.
За получаване на стандартизирана хепаринизирана плазма се препоръчват от 12 до 30 международни единици (IU) / ml нефракционирани натриеви, литиеви или амониеви соли на хепарин с молекулно тегло от 3 до 30 kD.
За определяне на йонизиран калций се препоръчва калциево титриран хепарин в концентрация от 40 до 60 IU / ml (суха хепаринизация) и 8 до 12 IU / ml кръв (течна хепаринизация).
Хирудин е антитромбин, извлечен от пиявици или получен чрез синтез на генно инженерство. Хирудин инхибира тромбина, образувайки хирудин-тромбинов комплекс в съотношение 1: 1. Използва се в концентрация 10 mg / l.
ЦВЕТНИ КОДОВИ ВАКУУМНИ ТРУБОВЕ С АНТИКОАГУЛАНТИ
Стандартът ISO 6710 представя следните цветови кодове за антикоагуланти:
цитрат за изследване на хемостатичната система - бледо синьо / зелено;
цитрат за скорост на утаяване на еритроцитите - черен / лилав;
без добавки (за серум) - червено / бяло.
Цветовото кодиране на капачките на вакуумните тръби съответства на цветните кодове на използваните в тях антикоагуланти.
ЕДТА - общо описание на свойствата, приложение в медицината и промишлеността
В координационната химия, преходните метали се свързват с йони или някои съединения във водни разтвори. Тези йони са известни като лиганди и заедно цялото съединение се нарича координация. Няколко съединения имат способността да се свързват с централния метален атом повече от веднъж и са описани като полидентатни, което буквално се превежда като "много зъбен". Тези съединения са описани по този начин, защото те се прикрепят към централния атом в няколко точки. Етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA) е такъв полидентатен лиганд. По-специално, етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA) е хексадентатен лиганд, тъй като хекса означава шест и лигандът е прикачен шест пъти.
Етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA) - общо описание, свойства
EDTA, или етилендиаминтетраоцетна киселина, свързва общо 6 места (4 кислород и 2 азота) върху йона в разтвора. Молекули, които се свързват в няколко точки в координационното съединение, се наричат хелатиращи.
Фигура 1: Напълно протонирана форма на EDTA4-, h5EDTA. Непротонирана форма се образува във връзка с отстраняването на водородните атоми във всяка от четирите групи карбоксилни киселини. В непротонирана молекула етилендиаминтетраоцетната киселина има допълнителни, несдвоени електрони върху четири кислородни атома, които имат единични връзки с въглеродни атоми и два азотни атома.
Хелатът има тенденция да бъде по-термодинамично стабилна молекула и хелатни съединения са склонни да изместват монодентатите в координационни съединения в разтвор. Това се дължи по-специално на факта, че реакциите с нарастваща ентропия са спонтанни и „искат“ да се случват повече. Например, вижте следния пример на уравнение, в което EDTA замества водните лиганди:
Тук водният комплекс на желязото се превръща в желязна молекула, заобиколена от една молекула етилендиаминтетраоцетна киселина. Това е така, защото от лявата страна на уравнението има две молекули - сложно съединение от желязо и етилендиаминтетраоцетна киселина - докато от дясната страна на уравнението има седем молекули - ново сложно съединение от желязо и шест молекули вода, изместени от EDTA лиганда. Ентропийно благоприятните реакции възникват спонтанно, а увеличаването на броя на молекулите е увеличение на ентропията. По този начин горната реакция протича спонтанно, със стойност на К над 1025. Общата тенденция, която е логична, ще означава, че полидентатни лиганди, които имат повече "зъбни" или свързващи точки с централни атоми, са по-термодинамично полезни / стабилни, и, следователно, могат да бъдат използвани за изместване на по-слаби, монодентатни лиганди. Етилендиаминтетраоцетната киселина може да се свърже общо шест пъти, както е посочено в уравнението за даденото по-горе желязо, например, така че е много добра молекула за изместване на други лиганди.
Фигура 2: ЕДТА молекулата свързва общо шест пъти с общ централен метал, обозначен с буквата М. Моля, обърнете внимание, че атомите с несвързани електрони (два азотни атома и четири кислородни атома) създават тези ковалентни координационни връзки.
Промишлена употреба на етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA) t
Поради доброто изместване на молекулите в координационните комплекси, етилендиаминтетраоцетната киселина може да се използва за предотвратяване на негативни реакции и вредни ефекти върху продуктите, причинени от наличието на нежелани метали в малки количества. Това приложение е известно като секвестрация. Например, по отношение на козметиката, етилендиаминтетраоцетната киселина служи за увеличаване на стабилността на козметиката по отношение на молекулите във въздуха. По същия начин, в продуктите за лична грижа и грижа за кожата, EDTA се свързва със свободни метални йони и служи като почистващ и консервиращ агент. Това основно намалява "твърдостта" (или наличието на метални катиони) във водата от чешмата, така че другите съставки в шампоаните и сапуните могат да изпълняват по-ефективно задачата си за почистване. В същия дух, етилендиаминтетраоцетната киселина се използва в детергентите за омекотяване на водата, която влиза в контакт с нея, така че другите активни съставки могат да бъдат почистени по-ефективно. В текстилната промишленост етилендиаминтетраоцетната киселина предотвратява обезцветяването на оцветените тъкани чрез премахване на вредни свободни метални йони, което също елиминира остатъчното утаяване в промишлено оборудване, което се използва при високи температури (т.е. пещи). Като цяло, етилендиаминтетраоцетната киселина намалява реактивността на метала, предотвратявайки всички нежелани ефекти, които могат да възникнат от неговото присъствие. EDTA се използва в солева форма, най-често под формата на динатриева етилендиаминтетраоцетна киселина или калциева динатриева сол на етилендиаминтетраоцетна киселина.
Медицинска употреба на етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA)
В допълнение към промишлената приложимост, етилендиаминтетраоцетна киселина може да се използва и в медицината. Лекарите могат да предписват етилендиаминтетраоцетна киселина на пациенти, страдащи от отравяне с олово. Това лечение се нарича хелаторна терапия, при която EDTA обработва токсичните йони, присъстващи в тялото, в безвредни. EDTA се прилага интравенозно и се разпределя в тялото през кръвния поток. Като се има предвид неговата хексадентатна природа, етилендиаминтетраоцетната киселина има молекулна структура, подобна на ноктите. Благодарение на тази структура EDTA изтласква токсични тежки метали, открити в кръвта и се свързва с йони на тези метали. Това свързване образува съединение, което се екскретира от тялото чрез урината, което им пречи да контактуват с ензими и цитохроми. Терапията с хелатори може да включва набор от процедури и една процедура може да продължи от един до три часа. Терапията с хелатори не само премахва вредните йони от тялото, но също така може да помогне за безопасното изхвърляне на живачни, хромни, кобалтови, никелови, цинкови, арсенови и талиеви йони от кръвния поток. В случай на прекомерна консумация на дигоксин, лекарство, използвано за лечение на предсърдно мъждене, предсърдно трептене и дори сърдечна недостатъчност, етилендиаминтетраоцетната киселина се използва за почистване на кръвния поток от неизползвани йони.
Ефект на етилендиаминтетраоцетна киселина върху околната среда
EDTA е много полезна като полидентатен лиганд. За съжаление, в момента тя е толкова широко използвана, че се счита за замърсител на околната среда. В крайна сметка той се разпада на етилендиаминтетраоцетна киселина, губейки една киселинна група и става токсична, след като образува дикетопиперазин. Нивата на етилендиаминтетраоцетна киселина понастоящем се наблюдават с помощта на техники за мас-спектрометричен анализ, въпреки че нивото на остра токсичност се смята за много ниско.
- Колко пъти етилендиаминтетраоцетната киселина се свързва в координационния комплекс?
- В какъв ред (в низходящ ред) са термодинамично стабилни вещества, подредени като лиганди: ONO, en (етилендиамин), EDTA.
- Кои са най-често срещаните форми на етилендиаминтетраоцетна киселина?
- Защо етилендиаминтетраоцетната киселина е толкова широко използвана? Защо това е проблем?
- Какво обикновено нарича професор Ларсен етилендиаминтетраоцетна киселина?
- EDTA е хексадентен лиганд, което означава, че се свързва шест пъти. Свързва се два пъти с йони с азот и четири пъти с кислородни йони.
- EDTA (която се свързва шест пъти), en (която се свързва два пъти), ONO (която се свързва веднъж)
- EDTA се използва най-често под формата на соли и в суха форма.
- EDTA е отличен хелатообразуващ агент, който позволява множество свързвания в координационния комплекс. Това му дава възможност да измести други нежелани лиганди, дължащи се на ентропията и термодинамиката, и по този начин се използва широко в лаборатории, фабрики, както и в медицината. Проблемът с прекомерното му разпространение е, че той се разгражда в токсин. Използването на ЕДТА широко, създава повече токсини, които остават в околната среда.
- „Кракен”, защото е последният лиганд (свързва се шест пъти, което е много голям индикатор за свързване на лиганда).
Пълна кръвна картина + левкоцитна формула + ESR (кръв с EDTA)
Общ анализ с левкоцитна формула. Концепцията за общ кръвен тест включва набор от показатели, които позволяват да се оцени хемопоетичната система, хемоглобиновата кръвна наситеност, да се идентифицират възпалителните реакции и др.
Пълна кръвна картина е първото задължително лабораторно изследване, което се възлага на всяко лице, независимо от възрастта, целта на изследването, предложеното заболяване.
Хемоглобинът (Hb) е сложен протеин, който е основният компонент на червените кръвни клетки. Хемоглобинът участва в процесите на свързване и транспорт на кислород. Той не само пренася кислород от белите дробове в периферните тъкани, но и ускорява транспортирането на въглероден диоксид от тъканите в белите дробове. Концентрацията на хемоглобин при здрав човек зависи от възрастта и пола. При патология нивата на хемоглобина могат да варират значително. По този начин се наблюдава намаление на хемоглобина при различни типове анемия, чието естество се оценява по няколко лабораторни показателя и клинични данни. Повишени стойности: - еритремия - кръвни заболявания с прекомерен синтез на еритроцити - симптоматична еритроцитоза (например със сърдечни дефекти, тежка сърдечно-белодробна недостатъчност, бъбречно заболяване, престой при високи планини).
Червените кръвни клетки, или червените кръвни клетки, са без ядрени клетки. Основната функция на червените кръвни клетки е транспортирането на кислород и въглероден диоксид. Тази функция се осигурява от специален пигмент - хемоглобин, който има желязо в състава си. В допълнение, червените кръвни клетки участват в транспорта на аминокиселини, антитела, токсини и редица лекарствени вещества. Броят на червените кръвни клетки е един от най-важните показатели за общ кръвен тест. Намаляването на броя на червените кръвни клетки в кръвта (червените кръвни клетки) е един от признаците на анемия. Степента на еритроцитопения варира при различните форми на анемия. Така че, в случай на желязодефицитна анемия поради хронична загуба на кръв, броят на червените кръвни клетки може да бъде нормален или леко намален. При остра загуба на кръв, B12-дефицитна, хипопластична и хемолитична анемия, броят на червените кръвни клетки в кръвта намалява значително, което може да изисква спешни медицински мерки (преливане на кръв и др.). В допълнение към анемията, може да се наблюдава относително намаляване на броя на еритроцитите с увеличаване на циркулиращата кръв по време на бременност (но по-често има желязодефицитна анемия при бременни жени), свръххидратация (излишък на течност, например, с масирана инфузия на разтвори, остра бъбречна недостатъчност и др.) И някои други състояния, Увеличаването на броя на еритроцитите в кръвта (еритроцитоза) е един от типичните признаци на еритремия (кръвна болест с прекомерен синтез на еритроцити). В допълнение, често се наблюдава увеличаване на броя на червените кръвни клетки при хронични белодробни заболявания, сърдечни дефекти, наличие на анормални хемоглобини, прекомерно физическо натоварване, излагане на високи надморска височина, затлъстяване. Някои злокачествени заболявания на черния дроб и бъбреците могат да бъдат придружени от еритроцитоза. При дехидратация (дехидратация), алкохолизъм и някои други състояния може да се наблюдава относителна еритроцитоза (поради намаляване на обема на циркулиращата кръв). Индексите на еритроцитите са изчислени стойности, които позволяват количествено характеризиране на важни показатели за състоянието на еритроцитите. MCV - означава обем на еритроцитите (среден клетъчен обем). Това е по-точен параметър от визуалната оценка на размера на червените кръвни клетки. Въпреки това, тя не е надеждна с голям брой червени кръвни клетки с модифицирана форма. Въз основа на стойността на MCV се различават микроцитна анемия (железен дефицит, таласемия), нормоцитни и макроцитни. Микроцитозата е характерна за желязодефицитни анемии, макроцитоза - за В12 и фолиева недостатъчност. Апластичната анемия е нормална или макроцитна. Повишена: - Мегалобластична анемия (В12-дефицитна, фолиева недостатъчност) - Макроцитоза (апластична анемия, хипотиреоидизъм, чернодробно заболяване, метастази на злокачествени тумори) - Пушене и консумация на алкохол Намаляване на MCV: - Хипохромна и микроцитна анемия (анемия) - Хемоглобинопатии - хипертиреоидизъм (рядко) MCH - средно съдържание на хемоглобин в еритроцитите (среден клетъчен хемоглобин). Изчислява се в абсолютни единици чрез разделяне на концентрацията на хемоглобина на броя на червените кръвни клетки. Този параметър определя средното съдържание на хемоглобин в един еритроцит и е подобен на индекса на цвета, но по-точно отразява синтеза на Hb и неговото ниво в еритроцитите. Въз основа на този индекс, анемията може да се раздели на нормо, хипо и хиперхромна. Нормакромията е характерна за здравите хора, но може да се появи и при хемолитични и апластични анемии, както и при анемия, свързана с остра загуба на кръв. Хипохромията се причинява от намаляване на обема на еритроцитите (микроцитоза) или намаляване на нивото на хемоглобина в еритроцитите с нормален обем. Т.е. Хипохромията може да се комбинира с намаляване на обема на еритроцитите или може да се наблюдава при нормална и макроцитоза. Хиперхромията не зависи от степента на насищане на еритроцитите с хемоглобин, а се причинява само от обема на червените кръвни клетки. Повишена MSN: - Мегалобластична анемия (витамин В12 и фолиева недостатъчност) - Чернодробно заболяване - Фалшива височина (множествен миелом, хиперлевкоцитоза) MCH понижение: Желязодефицитна анемия MCHC (средна концентрация на хемоглобина в клетките) е средната концентрация на хемоглобина в еритроцитите. Изчислява се чрез разделяне на хемоглобиновата концентрация на кръвта (в g / 100 ml) с хематокрит и умножение с 100. Индикаторът отразява наситеността на еритроцита с хемоглобин; характеризира съотношението на хемоглобина към клетъчния обем. Следователно тя не зависи от обема на клетката, за разлика от MCH. Повишена MCHC: Вродена сфероцитоза и друга сфероцитна анемия Намален MCHC: - Желязодефицитна анемия - Таласемия - Някои хемоглобинопатии Хематокрит отразява съотношението на червените кръвни клетки в общия кръвен обем. Нарастването на концентрацията се наблюдава при еритроцитоза, дехидратация (заболявания на стомашно-чревния тракт, придружена от обилна диария, повръщане, диабет), намаляване на обема на циркулиращата плазма (перитонит, огнено заболяване). Наблюдава се намаление при анемия, увеличаване на обема на циркулиращата плазма (сърдечно-съдова и бъбречна недостатъчност, късна гестационна бременност), хронични възпалителни процеси, увреждания, продължително почивка на легло, гладно и онкологични заболявания. В костния мозък и лимфните възли се образуват левкоцити или бели кръвни клетки. Тяхната основна функция е да защитават от чужди агенти. Някои видове левкоцити осигуряват унищожаването на микроби, чужди вещества и продукти на клетъчен разпад, както и участват в образуването на имунитет. Тези клетки са способни на активно движение. Те се разпространяват през кръвния поток в цялото тяло, проникват в различни органи и тъкани, където са най-активни. Левкоцитите са хетерогенни, сред тях има различни видове клетки, броят на които може да се прецени по формулата на левкоцитите. Съдържанието на левкоцити в циркулиращата кръв е важен диагностичен индикатор. Броят им зависи от образуването на тези клетки в костния мозък и скоростта на тяхното освобождаване в тъканта. При здрав човек броят на левкоцитите може да варира значително в зависимост от приема на храна, физическия и психическия стрес. Увеличаването на броя на левкоцитите в периферната кръв се нарича левкоцитоза. Основните причини за левкоцитоза включват: инфекции (бактериални, гъбични, вирусни); всички възпалителни състояния; травма; кръвни заболявания (левкемии, при които броят на левкоцитите в кръвта се увеличава десетократно); злокачествени новообразувания. Намаляването на броя на левкоцитите в кръвта се нарича левкопения. Заболявания и състояния придружени от левкопения: - вирусни инфекции (морбили, рубеола, инфекциозна мононуклеоза и др.); - аплазия и хипоплазия на костния мозък, - инхибиране на функциите му при продължителна полихимиотерапия, радиация и др.; - продължителна употреба на някои антибактериални, противовъзпалителни, антикоагулантни лекарства; - йонизиращо лъчение; Изчерпване на запасите от костен мозък на левкоцити при някои дългосрочни настоящи остри инфекции (коремен тиф, паратиф, салмонелоза и др.). Левкоцитната формула е процентът на различните видове левкоцити в кръвта. Изследването на левкоцитната формула е важен лабораторен тест, който предоставя диагностична информация за естеството на много заболявания, тежестта на състоянието на пациента, ефективността на лечението. В левкоцитна формула се определят следните видове левкоцити: Неутрофилите защитават организма от инфекции. Най-често броят на неутрофилите се увеличава с остри възпалителни, инфекциозни заболявания, с тъканна некроза, интоксикация. Еозинофилите участват в развитието на алергични реакции. Техният брой най-често се увеличава при алергични състояния и хелминти, по-рядко при тумори и някои колагенови заболявания. Базофилите участват в алергични и възпалителни реакции. Броят им нараства при всякакви алергични заболявания, някои кръвни заболявания, хипотиреоидизъм и др. Лимфоцитите са основните клетки на имунната система, осигуряващи адекватен имунен отговор на организма при поглъщане от чужди агенти. Съдържанието на лимфоцити в кръвта се увеличава с инфекциозна мононуклеоза, много други вирусни инфекции, както и заболявания на лимфната система и кръвта. Моноцитите са клетки, които осигуряват фагоцитоза, т.е. "Поглъщащи" чужди микроорганизми. Моноцитоза - увеличаване на броя на моноцитите - е характерна за много инфекции: туберкулоза, инфекциозна мононуклеоза, сепсис. Намира се в кръвни заболявания, болести на колагена. Тромбоцитите са кръвни тромбоцити, чиято основна функция е образуване на тромби. Тромбоцитите са способни да се придържат към увредената част на съдовата стена, да се слепват и по този начин да образуват първичен тромб, който по-късно се подсилва от фактори на плазмената коагулация. При недостиг на тромбоцити, тези процеси се нарушават и човек се появява кървене. Най-често се наблюдава намаляване на нивата на тромбоцитите при: - кръвни заболявания (някои видове анемия, остра левкемия и др.) - наследствен тромбоцитен дефицит - автоимунни заболявания (антифосфолипиден синдром, колагеноза и др.) - някои инфекции (преходна тромбоцитопения при септични процеси, вирусни инфекции) - метастатично увреждане на костния мозък - лекарствени ефекти (приемане на аспирин и други антиагреганти, някои антибактериални средства и др.). Може би леко краткотрайно намаляване на броя на тромбоцитите в кръвта по време на предменструалния период и първите дни на менструацията. Увеличаването на броя на тромбоцитите е характерно за много злокачествени процеси, някои кръвни заболявания и инфекции. Относителна тромбоцитоза е възможна с удебеляване на кръвта (например, с дехидратация).
Урок за "вземане на кръв от периферна вена"
Запазете връзката в една от мрежите:
4.2.2. Вакуумни тръби: видове, цветно кодиране
Вакуумните тръби са основен компонент за вземане на венозна кръв. Епруветките са направени от стъкло или специален материал полиетилен-терфталат (пластмаса и стъкло), което е особено издръжливо и предотвратява газообмена. Те се произвеждат и стерилизират във фабриката, предназначени за еднократна употреба. Тръбите се предлагат в различни обеми и размери и вече съдържат всички реактиви и добавки, необходими за анализа. Вакуумните тръби осигуряват вземането на необходимия обем кръв и съответно гарантират правилното съотношение на кръвта и реактива.
Епруветката се състои от три основни части:
безопасно покритие с идентификационен пръстен;
Вакуумните тръби с пълнител (не реагент) съдържат гел или гранули и се използват в случаите, когато е необходимо да се отделят кръвните компоненти. Гелът обгръща кондензираната кръв, отделяйки го от серума, гранулите се превръщат в някаква бариера, работеща като гел.
За някои видове тестове се добавя реагент (литий, хепарин, EDTA).
Вакуумните тръби са затворени с гумени запушалки или специални капачки Hemogard, които гарантират безопасността на техниката при работа с пробата. Цветът на капачката показва вида на пълнителя и предназначението на тръбата. Цветовото кодиране на тръбите съответства на международния стандарт ISO 6710.
Епруветки за серум
Кръвният серум е най-често използваният материал в клиничните диагностични лаборатории. За серум кръвта трябва да се съсири напълно.
Епруветките за серум са от два вида - стъкло и пластмаса. В стъклените тръби, функцията на активатора на коагулацията се извършва директно от самата чаша, тъй като тя съдържа силиций, който ускорява процеса на коагулация. Към пластмасовите тръби се добавят активатори на коагулацията - силициев диоксид и / или тромбин, за да се ускори процеса на коагулация. Тръбите могат също да съдържат специален гел или гранули за ясно разделяне на серума от кондензираната кръв.
Стъклените тръби без пълнител и пластмасови тръби със силициев диоксид за изследване на суроватката се отличават с червена капачка (фиг. 5, а). Епруветките за получаване на серум с тромбин се различават по цвета на капака или гумената запушалка в оранжев цвят (Фиг. 5, б, в). Тромбинът е естествен активатор на коагулацията и значително намалява времето за образуване на съсирек (3-5 минути). Тромбиновите тръби се използват за ускоряване на производството на серум, така че те се използват най-често за бързи тестове, когато е необходимо спешно да се получи информация за кръвния състав на пациента, например в интензивното отделение и др.
Произвеждат се стъклени тръби, които съдържат само тромбин, и пластмасови тръби със сложен пълнител - тромбин със силициев диоксид. Също така се произвеждат епруветки с тромбин и гел, времето на съсирване в което 3-5 минути.
След напълване на епруветката с тромбин, уверете се, че се смесват чрез инвертиране 5-6 пъти. Пълното кръвосъсирване се появява за 5 минути.
Тръби с гел за получаване и сепариране на серум са направени само от пластмаса и могат да се различат по жълтата капачка (Фиг. 5, г). За да се отдели по-добре кръвния съсирек от серума, към тръбите се добавя гел. След вземане на проби, пластмасовите тръбички трябва да се смесят, като се обърнат 5–6 пъти.
Фиг. 5. Епруветки за серум: t
а - с активатор на съсирването (пластмаса);
в - с тромбин и гел;
Епруветки за изследване на плазмата
За да се получи плазма в епруветки, се използва литиева или натриева сол на хепарин, напръскана върху вътрешната повърхност на епруветката. Хепаринизираната плазма обикновено се използва за биохимичен и имунологичен анализ.
Основният ефект на хепарина е инхибирането на прехода на разтворимия фибриноген в неразтворим фибрин поради блокирането на активността на тромбина.
Тръбите без хепарин (литиев хепарин или натриев хепарин) се отличават със зеления цвят на капачката. Литиев хепарин се използва за клинични изследвания на кръвта, натриев хепарин се използва за избор на дози и мониторинг на литиева терапия. Епруветките с хепарин и сепариращият гел за получаване на плазма имат светлозелена капачка, те използват само литиевата сол на хепарина. Веднага след пълнене на тръбата и изваждане от нея, пробата трябва да се смеси старателно с 8-10 пъти. Центрофугирането трябва да се извърши веднага след вземането на кръв.
Фиг. 6. Епруветки за плазмата: а - с хепарин; б - с хепарин и гел.
Епруветки за коагулологични изследвания
При вземане на проби за изследване на хемостатичната система, натриев цитрат е стандартният антикоагулант. Механизмът му на действие се основава на свързването на йонизиран калций в кръвта, което води до обратимо блокиране на коагулационния процес.
Произвеждат се както стъклени, така и пластмасови тръби със синя капачка (фиг. 7). За да се предотврати изпаряването на натриев цитрат, пластмасовите тръби се произвеждат по специална технология от различни видове пластмаси и имат двойни стени.
Много е важно да се спазва правилното съотношение на кръвта към антикоагулант като 9: 1. Липсата на цитрат в пробата води до образуване на микробунчета и коагулация на пробата, а излишъкът - да наруши резултатите, дължащи се на свързването на калция от реагентите.
Когато се вземат проби в няколко епруветки от един пациент, епруветката с цитрат трябва да се напълни преди тръбата с активатор на съсирването. Веднага след вземането на пробата, тръбата трябва да се смеси внимателно 4-5 пъти.
CTAD комплексните тръби за пълнене (натриев цитрат / теофилин / аденозин / дипиридамол) могат също да бъдат използвани за някои коагулационни тестове.
Фиг. 7. Епруветки с натриев цитрат.
Епруветки за хематологично изследване
EDTA (калиева сол на етилендиаминтетраоцетна киселина) се използва като антикоагулант в епруветки за хематологични изследвания на цяла кръв. Антикоагулантното действие на EDTA се осигурява чрез свързване на калциеви йони в кръвта. В епруветки с леко пурпурна (люляк) капачка, антикоагулантът е под формата на разтвор или прах, напръскан върху вътрешната повърхност на епруветките (фиг. 8).
За да се гарантира правилното съотношение на кръвта и антикоагулантната тръба с EDTA, трябва да се напълни точно до определения обем. Липсата на EDTA в пробата води до неговата коагулация, а излишъкът - до набръчкване на кръвни клетки и изкривяване на такива клинични показатели като хематокрит, размер на клетките и др.
Веднага след вземане на кръвта в епруветката с EDTA, тя трябва да се разбърка добре, завъртайки 8-10 пъти.
Фиг. 8. Епруветки за хематологично изследване на цяла кръв.
Епруветки за специални тестове
Тръби за тестване на глюкоза
За стабилизиране на глюкозата се използват тръби със сива капачка и следните пълнители: натриев флуорид и калиев оксалат, йодоацетат и литиев хепарин, натриев флуорид и EDTA.
Тръбите трябва да бъдат пълни до обема, посочен върху тях. След вземане на проби тръбите трябва да се смесят, завъртайки 6-8 пъти. Тъй като флуоридните / оксалатни тръби са особено предразположени към хемолиза, те трябва да бъдат смесени с изключително внимание.
Фиг. 9. Епруветки за изпитване на глюкоза.
Епруветки за изследване на микроелементи
Микроелементите са в кръвта в изключително малки количества, така че използваните материали трябва да изключват възможността за замърсяване на пробата с чужди тела. Това е възможно с използването на специални тръби със синя капачка (фиг. 10).
Епруветките са предназначени за изследване на цинк, желязо, мед, калций, селен в кръвта; както и токсикологични изследвания на олово, кадмий, арсен, антимон.
Вземането на проби и подготовката на пробата се извършват в съответствие с използвания пълнител: те могат да бъдат с активатор на съсирването, К2-ЕДТА или натриев хепарин или без пълнител. При анализа на серума за наличие на микроелементи в следи, не се препоръчва да се използват стандартни тръби с червена капачка, тъй като те съдържат повишена концентрация на цинк и други микроелементи.
Когато се взима кръв от един пациент на няколко вакуумни тръби наведнъж, е необходимо да се запълни тръбата за микроелементи с последната, за да се намали вероятността от заразяване на пробата през иглата.
Фиг. 10. Епруветки за изследване на микроелементи.
Епруветки за изследване на нестабилни протеинови хормони
За да се запазят нестабилните ензими и протеинови хормони в епруветки, се използва протеиназен инхибитор апротинин с антикоагулант ЕДТА в епруветки. Използва се за стабилизиране на такива хормони и ензими като ренин, адренокортикотропен хормон, глюкогон, соматостин, калциев тонин, остеокалцин, b-ендорфин, секретин, невротензин, вазоактивен чревен пептид. Апротинин се съдържа в 5-10 ml епруветки с розова запушалка.
Епруветки за определяне на кръвна група с розова капачка
Тези тръби се използват както за кръвни групи, така и за кръстосани трансфузионни тестове. Предлага се без пълнител, със силициев диоксид (активатор на коагулацията) или K2EDTA. Специален етикет на епруветката е удобен за записване на информация за донора и пациента.
Фиг. 11. Епруветки за определяне на кръвна група.
Епруветки за стабилизиране на цяла кръв (за имуногематология)
Тръбите за пълно стабилизиране на кръвта съдържат комбиниран ACD ексципиент, състоящ се от активен антикоагулант на тринатриев цитрат, лимонена киселина, която осигурява буферен разтвор с тринатриев цитрат и декстроза, хранително вещество за червените кръвни клетки. ACD стъклените тръби могат да се разграничат от светложълта капачка, те обикновено се използват в имунни хематологични единици за анализ на левкоцитни повърхностни антигени (HLA типизиране, някои поточни цитометрични приложения, тестове за левкоцитна функция и специални имунологични тестове).
В тръбите пълнителят ACD присъства като разтвор (тип А или В). Цяла кръв се смесва с пробата в съотношение 1: 6 (1 част ACD на двете концентрации до 6 части от пробата).
Веднага след пълнене на епруветката с ACD, пробата трябва да се разбърка старателно 8-10 пъти.
Фиг. 12. Стъклени тръби с ACD за имуногематология.
Епруветки за измерване на ESR по метода на Westergren
Системата за определяне на скоростта на утаяване на еритроцитите (ESR) по метода на Westergren се състои от вакуумни тръби за вземане на венозна кръв и статив с градуирана скала.
Стерилни стъклени тръби, затворени с черна капачка от хемогард, съдържат разтвор на натриев цитрат. Когато епруветката е изцяло запълнена с кръв (5,2 ml), съотношението на кръвта към антикоагулант е 4: 1.
Стативът е проектиран за 10 епруветки, всяка клетка е снабдена с механизъм, чрез който нивото на пробата в епруветката се комбинира с нулево ниво на скалата на триногата. Измерването на ESR се извършва в затворена първична тръба и пробата не трябва да се излива и допълнително се разрежда.
Пробата се съхранява до анализ при стайна температура, далеч от слънчева светлина и нагреватели. Анализът трябва да се извърши в рамките на 6 часа след вземането на пробата. За да направите това, епруветката се поставя в специален статив, стоящ на равна хоризонтална повърхност. По време на целия период на изпитване стативът трябва да остане неподвижен. След това се комбинира нулевата марка с менискуса на пробата и след 60 минути се записват стойностите на ESR в градуираната скала на триножника между еритроцитите и плазмата.
Фиг. 13. BD Seditainer система за определяне на ESR по метода Westergren.
Епруветки за молекулярна диагностика
Епруветки за плазмени и молекулярни диагностични тестове
Тези пластмасови стерилни епруветки се използват за събиране на кръв, подготовка на пробите, транспортиране и съхранение на неразредената плазмена проба. Тръбите се различават в перлен-бял капак и се използват за определяне на вирусното натоварване при ХИВ инфекция и вирусен хепатит, както и за провеждане на анализи чрез молекулярно-диагностични методи (например, PCR) и са идеални за съхранение и транспортиране на плазма.
Тръбите съдържат антикоагулант К2ЕДТА в прахообразна форма, напръскани по стените на епруветката, и полиестерен гел, което позволява отделянето на плазмата от кръвните клетки по време на центрофугирането.
Фиг. 14. Епруветки за разделяне на плазма с К2ЕДТА и гел
Веднага след пълнене на епруветката и изваждане от нея, кръвта трябва да се смеси внимателно с антикоагуланта, внимателно да се завърти 8-10 пъти. Пробата преди центрофугиране трябва да се съхранява при стайна температура за не повече от 2 часа, далеч от слънчева светлина и нагревателни устройства.
Плазмата в епруветките може да се съхранява замразена при -70 ° С. В тръбите стабилността на HIV РНК и вируса на хепатит С се поддържа 72 часа при стайна температура.
Епруветки за изолиране на мононуклеарни кръвни клетки (моноцити и лимфоцити)
Тръбите позволяват отделянето на мононуклеарни клетки от периферна кръв в една стъпка и в една първична тръба, чиито вътрешни стени са покрити със силикон, за да се сведе до минимум неспецифичното клетъчно активиране.
Епруветките се предлагат в два вида:
със синьо-черен корков корк (епруветки с натриев цитрат);
с червено-зелена запушалка (натриеви тръби хепарин).
Епруветките съдържат гел за разделяне на антикоагулант и специален течен фикол, създавайки градиент на плътност за отделяне на моноядрени клетки. Тези тръби са предназначени за: t
проучвания на количествените и функционалните характеристики на мононуклеарните клетки, проучвания на тяхната активност,
откриване на злокачествени новообразувания,
анализ на генетични маркери,
изследване на провирусна ДНК, РНК вируси (включително HIV).
Веднага след отстраняване на епруветката с кръв от държателя, тя трябва внимателно да се завърти 8-10 пъти. Пробата преди центрофугиране трябва да се съхранява при стайна температура за не повече от 2 часа, далеч от слънчева светлина и нагревателни устройства.